由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質(zhì)復(fù)雜,色譜柱極易被污染,是導(dǎo)致柱壓升高、分離能力下降的原因之一,通常有下面兩種情況。
1、直徑大于篩板孔徑的顆粒物,堵在柱頭篩板上,極易導(dǎo)致柱壓高;上樣前用針式濾器過濾將很好的解決這個(gè)問題,一般有0.22和0.45um規(guī)格,根據(jù)您的需要選擇合適規(guī)格的。同時(shí)在柱前接上在線過濾器,可過濾流動相攜帶的顆粒,泵、進(jìn)樣閥磨損流失的顆粒物。
2、吸附性強(qiáng)的小分子很難洗脫下來,多次上樣后聚集在柱頭,可導(dǎo)致柱效差,柱壓高,尤其是食品、生物、環(huán)境樣品更容易損傷色譜柱,建議用SPE固相萃取去雜,并安裝保護(hù)柱。
反相液相色譜柱養(yǎng)成測柱效的習(xí)慣,正確評價(jià)色譜柱
每個(gè)廠家的色譜柱出廠報(bào)告中都會附有一份柱效報(bào)告譜圖,代表該色譜柱的性能,我們只要留意理論塔板數(shù)和拖尾因子即可。當(dāng)拿到色譜柱后,建議先測柱效(可參照出廠柱效報(bào)告上的方法),保留譜圖,再做樣品。
當(dāng)使用了一段時(shí)間后,或者實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)問題時(shí),換一臺正常的液相儀測柱效,對比上述保留的新柱柱效報(bào)告來評價(jià)該色譜柱,這樣做可以排除液相儀、樣品等其它因素,正確的判斷色譜柱是否合格。
在修復(fù)損壞的色譜柱時(shí),柱效測試將是您判斷是否修復(fù)好的*指標(biāo),并且柱效測試流動相很簡單,能快速驗(yàn)證。